求教提取细胞核蛋白

WB检测组蛋白，使用索莱宝的核蛋白提取试剂盒，电泳后考马斯亮蓝染色后发现组蛋白那没有条带，实验条件如下，求教圈内大神指点。

样本：成纤维样滑膜细胞（FLS），约50w

加入细胞浆蛋白裂解液50ul（说明书上200w Hela加入200ul，FLS较hela大），冰上裂解20min，10min吹打一次，14000g离心10min，吸取上清；

沉淀再次加入细胞核蛋白裂解液50ul（说明书上200w细胞提取浆蛋白后加入50-100ul，如按比例本次加入较多），冰上裂解20min，10min吹打一次，14000g离心10min，吸取上清为核蛋白。

12%SDS-PAGE分离胶，5%浓缩胶；

电泳：80V 40min，120V 50min，溴酚红距离胶底1cm；

考马斯亮蓝快速染色30min，染色如下：

目标蛋白：组蛋白H3，分子量17KDa

并没有看到条带，孵育抗体后也没有条带，求教！