【求助】一直做不出噬菌斑是什么原因？

最近课题组开展了噬菌体相关的研究，才开始就遇到问题了。宿主菌是铜绿假单胞菌，用同一株菌加噬菌体在液体培养基中培养过夜后，培养基还是比较澄清的，我认为噬菌体对株菌应该是有效的。然后我把宿主菌到双层板，然后将噬菌体滴到上层后，能够形成空斑图(1)。然后将宿主菌100μL和噬菌体100μL混合后到双层板怎样都长不出噬菌斑。我以为是比例的问题，但是提高宿主菌的比例或浓度，分别将噬菌体或宿主菌梯度稀释，改变混合孵育的时间5min-20min，降低到上层培养基的温度，怎么改变条件都长不出明显的噬菌斑图(2-6)。只能看见很浅的很不明显的斑图(7)，这是什么原因呀？谁能给我个思路不？

ps几个月之前做过一次，同一个噬菌体，宿主记不清用的什么了，能长出很明显的噬菌斑图(8，9)。