细胞污染经历
给大家分享吐槽一下我第一次遇到细胞污染的经历,希望大家实验顺利。
事情是这样的,我的实验从今年一月份开始出现反复的细胞污染现象,我的实验操作虽远远不及教科书级别,但是实验室摸爬了一年从未出现过类似现象。
在专业人员的指导下,我更换了所有可疑污染源,例如枪头,培养基,血浆,培养皿;复苏了新的细胞,操作上更是非常仔细。但是最终我复苏的所有细胞不到一周都会死掉,如下图1。
排查了众多可疑污染源未果后,我将下一个目标望向了双抗,我的双抗是上一届师兄留下的,长期冰冻还未开封,离保质期还有短短一个月,可能存在失活的情况,但产品技术指导人员表示绝不可能存在污染。一次无心镜下观察中我发现我所使用的这瓶双抗尽然能在高倍镜下看到杂质,如图2。
产品指导表示,产品可能冻存时间过长,晶体析出。于是我将双抗1ml与完全培养基4ml加入培养瓶,5ml完全培养基加入培养瓶作为对照,同时培养(恒温箱孵育2天),培养前的图片忘记保存了,双抗组与图二类似,有少许“结晶”,而培养基组镜下无任何沉淀过杂志。两天后双抗组出现大量微生物(如图3),培养基组如两天前无变化(如图4)。
即使是这样,产品指导也坚决认为双抗是没有问题的,一定是操作过程中造成了双抗的污染,与他的交流过程中反复要求我拍照举证,提供当时的收据以及产品编号,甚至需要我联系当时的经销商,各种推脱,没有一句对于自己产品给用户造成的时间经济损失的道歉。实验前后污染了三种细胞株以及各种实验耗材及试剂,耗时一月半,我作为一名学生只能自己承担这些损失。
本来想想能够找到污染源已经可以了,没有白费这些精力,但是产品指导的态度实在太差,想要他承认错误道歉也办不到,实在心寒。发出来也给大家避避坑吧,希望大家不会遇到类似情况。
产品:VivaCell&BI。如图5

图5

图3

图4

图2

图1