细胞和组织染色实验介绍

研究机体对各种刺激的反应时，除了大家常了解的QPCR、western blot或者ELISA，还有各种染色实验，通过特殊的染色实验了解机体各种属性表征，下面给大家介绍几种染色实验；

一、细胞鬼笔环肽染色

细胞骨架主要由微丝、微管和中间丝所组成，微丝主要是肌动蛋白组成，分为成肌动蛋白和纤维状蛋白单体。鬼笔环肽是一种双环七肽，是从鬼笔鹅膏中分离出来的。可以结合纤维状肌动蛋白，从而可以通过染色显示微丝在细胞中的分布，因此鬼笔环肽荧光染液在生物研究中被广泛使用。

1.实验步骤

（1）样本：细胞爬片

（2）实验步骤：PBS清洗细胞3次，每次5Min;4%多聚甲醛溶液室温固定20min；PBS清洗3次，每次5min；取200ul配置好的FITC标记鬼笔环肽的工作液覆盖铺满细胞的爬片，室温孵育30-60min；PBS清洗玻片3次，每次10min；使用200ul DAPI染色液对细胞核染色，10min;PBS清洗3次，每次10min；吸去多余水分，加上荧光封片液，盖上盖玻片，显微镜下观察拍照；

2.染色示例 

二、线粒体染色

Mito-Tracker 是一种细胞色素，可以结合细胞线粒体内的脱氧核糖核酸，在活细胞中只需要简单孵育，就可以渗透到质膜中标记线粒体。但是此类染料一旦被固定荧光就会消失，因此一般用于活细胞实验。

1.实验步骤：

（1）样本：细胞悬液；

（2）实验步骤：Mito-Tracker Green工作液的配置、Mito-Tracker Green工作液使用前需37ºC预温育，离心去除细胞培养液，用PBS清洗2次，每次5Min；加入制好的并37ºC预温育的Mito-Tracker Green染色工作液，与细胞37ºC共孵育30分钟，离心去除Mito-Tracker Green染色工作液，用PBS清洗2次，每次5min，加入37ºC预温育的新鲜细胞培养液，荧光显微镜拍照观察；

2.染色示例

三、油红O染色

油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，比较容易和甘油三酯结合出现小脂滴状，和磷脂结合力较差，一般和细胞或者组织进行共孵育就可以试脂肪染色，方法比较简单，是判断脂滴产生的最简单实验。

1.实验步骤

（1）样本：细胞爬片或者切片

（2）实验步骤：细胞爬片经固定15min后，蒸馏水洗；60%异丙醇浸洗，油红O染液染10min；60%异丙醇分色至背景无色，蒸馏水洗；Mayer苏木素复染数分钟，PBS浸洗（蓝化）1-3min；蒸馏水洗后水溶性封片剂封片，普通白光显微镜观察拍照；

2.染色示例

还有其他很多染色方法，比如茜素红染色、masoon染色、番红固绿染色、甲苯胺蓝染色等等，在这里就不一一介绍了，如果对于染色比较感兴趣可以多关注哦。