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求助 | 热激法转pKD46-Tet到DH5α

发布于 2023-03-04 · 浏览 364 · IP 四川四川
这个帖子发布于 2 年零 68 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

求助 | 热激法转pKD46-Tet到DH5α,试了很多次,来来回回有两个周了,但是无论如何平板上就是长不出来,有人遇到过同样的情况吗?

方法步骤:2ul质粒(50ng/ul)+100ul感受态,冰浴30min,42℃热激90s,再冰浴2min,加无抗性LB肉汤30℃180rpm培养45min,随后离心或者不离心,涂布到抗性LB平板上(10ug/ml Tet)

后来也加大了pKD46-Tet的量,做了10ul质粒(50ng/ul)+100ul感受态,依然长不出来,求助求助!

最后编辑于 2023-03-04 · 浏览 364

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