dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

质粒条带问题

发布于 2023-01-05 · 浏览 4947 · 来自 Android · IP 北京北京
这个帖子发布于 2 年零 126 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
icon花匠是自己 推荐

求助:质粒电泳中,比超螺旋偏大的条带除了开环、线性还有其他情况吗(比如多聚体质粒)?

实验遇到的问题:

1.一个样品质粒提取后电泳发现无超螺旋条带,但酶切验证条带大小正确

2.重复实验小提一次,依然没有超螺旋条带

3.取原质粒重新转化后,可提取含超螺旋的质粒。但存在一些(实际发现一个)单菌落提取后也没有超螺旋条带。

但菌落PCR条带大小都一致,质粒酶切也都正确

img


图1:转化后4个单菌落,前2个疑似无超螺旋结构

4个样品单酶切为线性化的条带都一致,且6000bp左右与设计一致

img

图1.5:第1,3,5,7为质粒样品与图1对应,第2,4,6,8为前1质粒对应的单酶切样品

4.取图1中样品1无超螺旋条带的质粒,转化后平板上的单菌落,基本上全是这样无超螺旋的条带。

img

图2:前3个为图1中样品1转化后随机3个单菌落提质粒条带,样品4为原始质粒对照

最后编辑于 2023-01-06 · 浏览 4947

7 9 1

全部讨论0

默认最新
avatar
7
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部