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时间分辨微球标记抗体聚沉

发布于 2022-12-29 · 浏览 2525 · IP 浙江浙江
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Q:EP 管内 1mg/ml 微球,活化使用的 5 微升 EDC10 微升 NHS(浓度都是10mg/ml),离心去上清,用 1XBBS 重悬,然后加 0.1mg 抗体,发生了少量聚沉,求大神指点

A1:加抗体之前可以冲洗一下,可以有效避免聚沉。


Q:请教癌细胞加药处理做 transwell 迁移实验,是加药处理后消化再铺细胞到小室里,还是在小室里直接加药啊?

A1:我们是小室直接加药,结果也挺好的

A2:一般是先加药再放到小室,因为如果后加药的话药效会不确定。

A3:感觉应该是细胞铺到小室后,直接在下层培养基中加药。

A4:做 transwell 迁移实验,一般是加药处理后消化再铺细胞到小室里。


Q:想用石蜡切片进行革兰染色,请问脱蜡后直接染吗?如题,

石蜡切片应该染多厚呢?还有是染色后进行透明操作 还是脱蜡后直接透明,然后再染色呢?

A1:脱蜡后要用蒸馏水冲洗后再染色。

A2:染薄薄一层,先脱蜡,然后再染色。


Q:原代 BMDC 树突状细胞诱导 6 天以后(gm-csf +IL4联合),流式检测 CD11c 阳性率只有 40% 左右;

但是单看细胞 典型的未成熟的树突状细胞很多啊,不知道为什么 CD11c 阳性率只有40%,换了别人的抗体尝试也是不高的,大家遇到过这种问题吗?

或者 CD11c 能达到 80% 的同学们用什么方式做到的?太苦恼了~...

A1:培养基的体积对它的分化有影响。

A2:提高细胞密度,然后诱导一周后再做流式


Q:金标法测新冠抗原c区二抗能结合结合了抗原的金标抗体吗?

A1:当鼻咽拭子经抗原提取液处理后,若样品中存在新冠病毒,其中N蛋白与此处的金标抗体特异性结合,并带动金标抗体一同向前移动;未结合新冠抗原的金标抗体也同样随液流向前移动;随后依次经过硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测区(T)和质控区(C),结合新冠抗原的金标抗体,可以与 T 区的新冠单抗结合形成复合物(金标抗新冠单抗 2-新冠病毒蛋白-抗新冠单抗1),未结合新冠抗原的金标抗体在 C 区与羊抗鼠 IgG 抗体结合形成复合物(金标抗新冠单抗 2-羊抗鼠 IgG 抗体)。当质控区出现红色条带,意味着层析过程正常,也就是样品分子能正常涌动到达 C 区形成金标抗原抗体复合物。

A2:金标法测新冠抗原 c 区二抗能结和抗原的金标抗体的。

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新型冠状病毒肺炎||新冠 (455)

最后编辑于 2022-12-29 · 浏览 2525

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