构建载体求助！|T4连接酶构建载体
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最近构建一个载体，骨架5kb片段3kb，
第一次25℃4h第二次16℃16h，
第一次没有长斑，第二次长了两个斑但是测序不对
是不是因为载体的量不够呢，因为两次载体我都没用到50ng，但是实验室其他同学用t4连接酶的时候，载体都没有严格按照50ng，就是只加1uL。
应该是没有连上，但是有没有可能酶切的时候就出了问题，导致两个酶切位点连不上？
做了2周了一直没有结果我快撑不住了呜呜呜呜求大佬帮助！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2612
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