qPCR产物长度会影响Ct值吗
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收录时间 2025年5月22日
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今天突然想到的问题：qPCR产物长度会影响Ct值吗？
文献给出的引物序列qPCR产物长度在200bp左右，但是跑出来熔解曲线不好，所以另外设计了一对引物，qPCR产物长度只有100bp（当时没考虑到这个问题）。
用的是SYBR GREEN染料法，从原理上来说，qPCR产物缩短到1/2，Ct值会加1，不知道这样理解是否正确？这样跑出来的Ct值还能和同家族的其他基因（产物200bp）定量比较吗？（ps 我的内参基因产物为120bp）
希望有前辈同道指点一下 感谢！
最后编辑于 2022-08-30 · 浏览 3614
