CO-IP
发布于 2022-07-20 · 浏览 2611 · IP 河北河北
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园友们，又来请教大家了。
我最近在做CO-IP，两个蛋白的分子量分别为A（110KDa）、B（39KDa），实验是过表达了A蛋白，然后用B蛋白做的IP。最后提取出来的蛋白上清上样，跑Western Blot，同时跑了两板胶，之后两张膜分别孵育了A和B两种抗体。
孵育A抗体的膜1，Input组在A的位置（110KDa）有条带，在50KDa附近的IgG组和IP组也有条带。如图（组别左至右分别为Input---IgG---IP）
孵育B抗体的膜2，Input组无条带，在50KDa附近的IgG组和IP组也有条带。如图
（组别左至右分别为Input---IgG---IP）
问题是：IP组，出现在50KDa附近的条带，是B蛋白吗？如果是，那孵育A抗体的膜1，是不是能说明A和B有相互作用？如果说不是B蛋白，可能是重链的话，为什么看不到轻链的条带呢？但是IgG组有条带，这怎么解释呢？
在孵育B抗体的膜2，为什么Input组完全没有条带呢？
恳请有经验的战友给予解答！感谢！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2611
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