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为什么跑菌落PCR总是有别的条带,而且大小统一

发布于 2022-01-10 · 浏览 1150 · IP 湖北湖北
这个帖子发布于 3 年零 128 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近在构建酵母双杂的诱饵载体,目的片段2400bp,已经通过测序检测,是所需要的片段,载体用的是pGBKT7,用BamH1单酶切,再进行重组,重组体系:目的片段:载体=3:1(摩尔比),BamH1酶:1微升;Buffer:5微升;50微升体系;转大肠肝菌涂平板后,做菌落PCR,PCR体系:MIX:5微升;通用引物各1微升,ddH2O:3微升;结果条带都是700bp左右的,但是如果空载的话,通用引物跑出来的条带应该是300bp,就是感觉目的一直片段没有连接上,希望大家能指点一下,给点意见。

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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1150

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