腺病毒包装真的这么难成功么
用的pAdEasy系统将目的基因构建在pAdTrack腺病毒包装骨架质粒上面,经PACI酶切能切出来30+kb和4.5kb大小的条带表明同源重组成功。但是我把重组质粒PACI酶切产物转HEK293细胞后包装腺病毒总是没有彗星状荧光,反复包装了两个月试了五六次换过不同批次的细胞都没有成功,包装第10天仍只有散在的荧光。有人说是我细胞问题,但是他们之前也有用这批细胞包装成功的,请教经验人士到底问题出在哪点!

最后编辑于 2022-01-14 · 浏览 912
用的pAdEasy系统将目的基因构建在pAdTrack腺病毒包装骨架质粒上面,经PACI酶切能切出来30+kb和4.5kb大小的条带表明同源重组成功。但是我把重组质粒PACI酶切产物转HEK293细胞后包装腺病毒总是没有彗星状荧光,反复包装了两个月试了五六次换过不同批次的细胞都没有成功,包装第10天仍只有散在的荧光。有人说是我细胞问题,但是他们之前也有用这批细胞包装成功的,请教经验人士到底问题出在哪点!
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