WB显影出现很多竖条带，是什么原因呢？

用10%的分离胶，上样量是10ug/ul上样4ul的体积。电泳:80V20min跑浓缩胶，120V60min跑分离胶。电转:350mA 45min。电转完，用TBST清洗3次，配5%的脱脂牛奶封闭液，摇床750r 封闭2 h。封闭结束后，用的是Abcam的一抗，按1:1000加入一抗稀释液，一抗4℃孵育15-16h，一抗孵育结束后，用TBST清洗3次，1200r 5min每次。然后按1:2000用5%脱脂奶粉配成二抗稀释液孵育1h，750r 。二抗孵育结束后，用TBST清洗3次，1200r，5min。取出膜，轻轻用滤纸吸干TBST，加入发光液，显影。