重组抗原疫苗

recombinant antigen vaccine

概述

重组抗原疫苗是利用DNA重组技术制备的只含保护性抗原的纯化疫苗。优点在于不含活的病原体和病毒核酸,安全有效,成本低廉。目前有大量研究证实重组抗原疫苗可以更好地減少疾病发生。

乙肝疫苗及乙型肝炎病毒(HBV)重组抗原疫苗

有实验通过观察重组乙肝疫苗及乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原DNA疫苗接种后,C57BL/6(H-2^b)小鼠的免疫应答,比较重组抗原疫苗效应。构建质粒pVR1012-L,pVR1012-M,pVR1012-S,转染COS7细胞系进行表达,将C57BL/6小志分为5组,分别接种质粒pVR1012-L、pVR1012-M、pVR1012-S、VR1012 10μg及重组乙肝疫苗1μg,ELSA法检测小鼠血清抗-HBS结果显示DNA疫苗在转染细胞中可表达 HBsAg。血清抗HBs在第一次接种重组乙肝疫苗后即可检出,而在DNA疫苗组则未检出,此后重组疫苗组诱导的抗-HBs的滴度与DNA疫苗组相似。因而认为HBV表面抗原DNA疫苗在H-2^b小鼠试验中有体液免疫原性。

日本血吸虫(大陆株)基因工程重组抗原混合疫苗

阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病,其主要特征是记忆减退、认知障碍。主要的病理表现包括细胞外淀粉样蛋白的堆积形成老年斑,细胞内Tau蛋白的磷酸化形成神经纤维缠结,并最终导致神经元的失营养坏死。淀粉样蛋白级联假说认为,患者大脑内堆积过多的Aβ42/Aβ40是导致阿尔茨海默病产生的主要原因。因此,以Aβ作为靶标治疗老年痴呆症的各种主动免疫和被动免疫治疗方法不断涌现。有硏究针对免疫治疗阿尔茨海默病过程中岀现的免疫原性和安全性问题,提出优化的策略设计新型疫苗。采用人源Aβ42的B细胞表位Aβ1-15多拷贝串联重复后,融合含有13aa的辅助T细胞表位 PADRE构建了重组融合基因AB(1-15)6-T,加入A型肉毒毒素Hc片段后构建重组基因Aβ(1-15)6-T-AHc及Aβ(1-15)6-T-AHc-C。将以上基因分别克隆入原核表达载体和真核表达载体中,表达重组蛋白及构建DNA表位疫苗。同时硏究白细胞介素4及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 GM-CSF等细胞因子作为分子佐剂对于阿尔茨海默病DNA疫苗的免疫调节作用和免疫效果的影响。将重组融合基因克隆入原核表达载体pTIG-Trx中,优化表达条件后实现了重组蛋白的可溶性表达,His亲和纯化后得到可用于下步免疫实验的重组蛋白。其中,重组蛋白6Aβ及6Aβ-T经过分子量测定和肽谱分析表明具有特殊的二聚体结构,其功能结构尚需进一步研究确定。将四种重组蛋白6Aβ、6Aβ-T、6Aβ-T-AHc-C及AHc-5Aβ-T联合A(OH）3佐剂免疫Balb/C小鼠,四次免疫后,小鼠体内产生了较高的抗Aβ42抗体,最高抗体滴度可以达到1:25000左右。添加了辅助T细胞表位和载体分子的重组蛋白免疫组抗体水平明显提高。抗体亚型分析结果显示,重组蛋白免疫后主要产生IgG1及IgG2b亚型抗体,表明免疫反应主要是Th2型。淋巴细胞增殖实验表明重组蛋白免疫组未引起明显的Th1型免疫炎症反应。免疫组脾细胞经 PADRE刺激后产生了大量IL-4细胞因子,表明疫苗主要引起了Th2型免疫应答。研究表明,可溶性寡聚体的Aβ是大脑内毒性Aβ的主要形式, Dot-blot结果显示重组蛋白免疫后血清抗体特异性强结合Aβ寡聚体,弱结合单体,少或无结合纤维化状态的Aβ,提示我们重组蛋白免疫后产生的抗体可能能够特异性的清除或中和体内的Aβ42寡聚体,在AD免疫治疗中具有重大意义。