十分钟提取细胞RNA

实 验 步 骤 离心收集不超过3 x 106个细胞样品，加入100µl Buffer PBS，涡旋重悬细胞。加入500µl Buffer CRL，涡旋混匀10~15秒，静置1分钟。把HiPure RNA Mini Column装在2ml收集管中。转移全部混合液至柱子中。12,000 x g离心30~60秒。倒弃滤液，把柱子装回收集管。加入650µl Buffer CW至柱子中，12,000 × g离心30~60秒。   对于特殊高敏应用，可以重复第4步一次以提高纯度。多数的应用，如定量PCR等应用，洗涤一次已经足够的。(可选)倒弃滤液，把柱子装回收集管。加入300µl Buffer CW至柱子中，12,000 × g离心2分钟，按第7步进行操作。转移柱子时不要磁到底部的液体，若碰到底部的液体，按第6步进行操作。倒弃流出液，把柱子装回收集管。12,000 x g离心2分钟。将柱子转移至1.5ml离心管，加入50~80µl RNase Free Water至柱子膜中央。室温静置1~2分钟。12,000 × g离心1分钟。弃去柱子，把RNA保存于-80ºC。