sec-hplc分析蛋白纯度时出现了平头峰，很宽

全新的柱子，跑sec-hplc分析蛋白纯度时出现了平头峰，而且整个峰时间有10min左右

目前的情况是

1.这个蛋白很大，700KD左右，是个三聚体

2.应该不是上样量过大，因为跑这个样之前我跑了一次这种蛋白的纯的标准品，浓度更大，都上去了，还有尖峰

3.说明书建议流速是0.5ml/min，最大流速是1ml/min，为了保护柱子我室温下跑的0.4ml/min

所以想请问为什么会这么平呢，流速正常柱压一直监督着很正常，还是新柱子，应该不是柱子塌了。有人说多聚体蛋白会平一些，请问是真的吗？