178项药学实验室小技巧（二）

NO51、用HPLC法测定酚酸等不稳定成分时,可将对照品溶液及供试品溶液调成酸性(可用磷酸等),这样即不会影响测定结果,而且样品也比较稳定,保存时间比较长.PH值一般调到2.左右即可!
 
NO52、在进行HPLC测定时,所用的水最好是双蒸水,这样对测定结果干扰少,而且要勤换,如果通道生霉,可用异丙醇冲洗通道.有机相如已腈最好滤一下,即使是进口色谱纯溶剂。
 
NO53、薄层鉴别的层析板可进行预洗，这样的板分离效果好。
 
NO54、骨碎补原药材检验含量一般都合格.但提取后一般都不合格,是因为提取的方法不对。                                             
NO55、样品为西林瓶装的粉针剂在做无菌实验时,往往由于压力很难吸出来,但在加入无菌注射用水之前,先用无菌注射器推入少许空气,再加注射用水,就很容易用无菌注射器将样品溶液吸出来。
 
NO56、做微生物检查时，发现移液管中有干热灭菌法杀灭不了的细菌，我们对微生物检查的各个环节做了对照，才发的，后来就改用一次性注射器了，虽然浪费了点，但是这种现象再也没有发生过。
 
NO57、做红霉素片释放度时，酸度对释放度的影响不小，能差5～7个百分点，要及时更换硫酸，否则可能会影响释放度结果。
 
NO58、曾经做过一次微生物检查的验证，细菌一般培养48小时，霉菌72小时，其实在细菌20个小时，霉菌40个小时左右的结果和最终的结果很相近的，如果不是在边缘，完全可以在很着急的情况下下结论。
 
NO59、采用薄层法进行检测时，可在展开前在展开室四周用略低于展开室高度的滤纸贴在内壁，使展开剂充分预饱和，这样可取得较好的展开效果。
 
NO60、做格列吡嗪片含量时对照品不容易溶解，可在溶剂里面少加一点0.1mol的氢氧化钠溶液使对照品溶解后再定溶。
 
NO61、高效液相色谱柱的维护：
a．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）；
b．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围；c．避免流动相组成及极性的剧烈变化；
d．流动相使用前必须经脱气和过滤处理；
e．如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇或乙腈中；
f．氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。
 
NO62、1、萃取过程产生的乳化，在乳化不是太严重情况下将分液漏斗水平放置桌上。比用热布包裹的效果好和快。
2、只有药品性质稳定，可以将振摇工作交给超声仪器超声。即舒服、测定效果又好。如果药品性质不是很稳定，可以将其放在恒温振荡仪中。不设温度就好了，加上浴盖又避光、摇得又均匀。
3、清洗移液管等细长玻璃器具，冲洗要反其道进行。将尖头对着水柱清洗，省力很多。
 
NO63、在做人参皂苷RB1和黄芪甲苷时，如果同实验室中酸的浓度很高，这两个成分都会分解，从而测不出含量，所以应避免和挥酸时同时进行含量前处理。
 
NO64、做阿奇霉素片的溶出度时，用硫酸溶液（75--100）显色时，所用的硫酸浓度一定要够，最好用新开瓶的，显完色后应是金黄色的，否则可能是淡黄色的。测得的结果也低。
 
NO65、用HPLC法测物质含量时，温度的控制是很重要，最好用有柱温箱的，如果没有就要装空调保持恒温后再测定。但不至于一定出现基线飘移，更多时候是保留时间的变化，对结果影响也不一定，有时不会影响准确度。
 
NO66、萃取过程产生的乳化，在乳化不是太严重情况下将分液漏斗水平放置在水浴锅的孔上，用水蒸汽加热也是有效果的。
 
NO67、在做中药材的浸出物的检测时，药材的颗粒大小要过筛，过大的块状影响浸出效果。
 
NO68、铺聚酰胺板时其中粘合剂宜选用可溶性淀粉，可溶性淀粉先溶于热水中，晾凉后加入聚酰胺粉研磨就OK了。铺出来的板子没什么裂纹。聚酰胺粉大概0.7克左右，加可溶性淀粉0.3克左右溶于10毫升左右的水中。这可是我自己铺了很多次得出来的经验。只能用可溶性淀粉作粘合剂。
 
NO69、做红氧化铁含量测定时一定要用盐酸煮沸几分钟，不能因为危险而随便在水浴上加热，这样会使含测结果超过100%。
 
NO70、作萃取时.如产生乳化,可加入相应的盐类。
 
NO71、在做分析方法验证时，鉴别项的专属性一般都很强，像红外、紫外等，可不做专属性，但是注意显色反应的空白溶液，要保证溶液本身不显色。

NO72、如果做过三硅三酸镁的检测,是否会遇到这样一个问题:重金属检测时按照标准进行到最后,得到的样品呈现红色,与对照品的颜色(黄棕色)无法进行对照，其主要原是因为在此标准中加入酚酞调节溶液的酸碱度，最后一步加入硫代已酰胺试液后,溶液显碱性，使酚酞显红色。解决的方法是在最后加入盐酸进稍微多加一点,使溶液显酸性,最终使对照与样品颜色一致。
 
NO73、用GC测有机残留水不溶性成分时，如苯、二氯甲烷等，称取毫克级标样时，在量瓶底部预先加少量DMF/DMSO，会减少天平的跳动，帮助准确称量。
 
NO74、按2005版药典含量称样量必须严格控制在0.1g或以下,若称样量高氧化不完全会影响结果,使结果偏低。
 
NO75、骨碎补用沙热炒(使药材酥松)是中药材的一种炮制方法,这样可以使药材的含量在提取时充分溶解，有利于提高含量。
 
NO76、在做比色法测定环氧乙烷残留时。若加入品红后等待1h后不见比色管（实验中加入已二醇体积>0.8ml的比色管）呈微红色，则证明实验中所使用的高碘酸失效，需重新配置高碘酸。
 
NO77、做八角枫药材鉴别时如果最后不显斑点,一般是在分层的时候静置时间不够引起的。
 
NO78、在含量测定过程中，如果遇到测量结果不准时如何处理？根据我的经验在测量过程中可以带标准样品（已知含量）和被测试样品同时、平行进行测试。把测试结果和标准样品进行比较即可。这样的话，我们测试的结果就可以得到修正了。如已知含量的标准样浓度为1.0，而我们测试结果为0.91，我们就需要把样品的测试结果除以0.91即可得到相对准确的结果。采用“加标回收”的方法更好。只是相对复杂一些。
 
NO79、HPLC测含量时流动相若是乙腈，乙腈最好是新打开的，使用放置时间过长的乙腈容易导致检测不出主峰。
 
NO80、在做培养基的灵敏度实验的时候，同时做试验菌几个稀释级的试管，并同时取菌液计数。培养结束后，取菌液计数在小于100的培养结果做为测试结果，可以一次性将培养基的灵敏度测试出来，免除了当菌液计数结果不在要求范围时培养基的灵敏度测试结果作废，同时减少了实验误差。
 
NO81、生孢梭菌计数采用流体硫乙醇酸盐培养基(含琼脂),称取培养基15g，再加入纯化琼脂粉0.4~0.5g加入500ml蒸馏水后加热使溶解后分装至30*200的大试管中，50ml/管，加塞，包扎后灭菌，培养基温度保持在45~50摄氏度时，将稀释好的生孢梭菌菌液用吸管吸取1ml加入至培养基中，轻轻摇匀后置30~35摄氏度培养16~20小时，立即观察点计菌数，切记培养期间不可摇动试管，生长的微生物群体在培养基中分散成小米状，注意选择菌数在30~50之间的试管，便于点计。
 
NO82、检测纯化水硝酸盐时要缓缓滴加硫酸且在冰浴中不断摇均使其放热均匀，能使试验结果明显。
 
NO83、在用HPLC测定肝苏胶囊的含量时，其盐酸的浓度相当重要，浓度一定要够才行哟。
 
NO84、在做高液时,最好一次把流动相配足,如果先配的流动相不够,再用相同的方法去配的流动相继续用,会出现保留时间不一致.其次,在发现流动相不够时,最好不要把流出来的"废液"再收集起来继续用,这样出来的峰面积会增大的。
 
NO85、最近在省药检所学习了几天，介绍几行实验室常用的小装备，挺管用的。1滴定管活塞涂凡士林时，有时还是有点爱漏，药检所用的真空密封润滑硅脂，买了后用起来挺好的。2清洗玻璃器皿时用上海生产的玻璃器皿专用清洗剂，效果很好。3有时装有溶液的玻璃瓶想密封一下，用美国进口的密封膜。4有时取对照品时，瓶口太小，普通取样勺无法进入，不妨用掏耳朵的金属勺试试。
 
NO86、在用HPLC进行分析时，环境的温度，对基线的影响很大，八月份前后，我们的HPLC的基线一直走不稳，究其原因是我们开了空调，室内温度波动比较大，后来我们将HPLC放到一个面积小一点的房间。
 
NO87、配制和使用硝酸银滴定液时一定要注意不要弄到别处，因为当时你看不出来，过一二天弄脏的地方就会变黑。 我们在标化时就曾经将地砖上弄了一片，现在还能看出来呢。
 
NO88、做HPLC时，方法不要随意变更，前一段时间，我们有一产品，本来用乙腈溶解，峰形不好。一化验员把它改成用流动相溶解，峰形很好，但是样品分解了，主成分只有70%左右，车间人员急死了，最后才发现，这样品用流动相溶解很不稳定，降解很快，放十几小时后，主成分就没有了。
 
NO89、中药注射剂检验树脂项时,用的氯仿最好用优级的,不同的试剂对结果影响很大.同时在提取放置的时间尽量长些,使其完全分开。
 
NO90、HPLC流动相用到盐的时候，定期用热水清洗管路，有利于仪器的稳定。