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序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用,如何储存?

发布于 2021-01-14 · 浏览 1490 · IP 上海上海
这个帖子发布于 4 年零 124 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用,如何储存?

  1)如何溶解重组胰蛋白酶冻干粉?

  使用50mM HAc 溶解或稀释。

  2)使用时,溶解液和最适pH缓冲溶液?

  使用时,按照使用终浓度直接稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7-8的酶切缓冲溶液中(含有目的酶切蛋白)。

  3)酶切缓冲液中酶和底物的比例是多少?

  在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2

  重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100。

  4)酶切时的缓冲液最适pH?

  最适pH为7.0-8.0的缓冲液,通常用50mM NH4HCO3或者Tris-HCl。

  5)溶解后溶液如何保存?如果反复冻融,稳定性如何?

  溶液储存于-70℃。

  可反复冻融5次,无降解,无活性损失。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1490

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