小鼠灌注取脑组织的个人经验

本人每次都很郁闷输液针插入心脏后总容易掉出来，于是干脆全程右手拿着，左手单手完成其他操作

b6小鼠麻醉 虽然这小玩意才20-25g，但是我用5%的水合氯醛要0.5ml左右每只才能麻掉，平均等待3min

麻醉后固定到平板上，按组织层次剥离皮肤，剥离腹膜，剪刀由下往上，从肚子中间开始，保证能露出肠和肝

我习惯关注右侧视野，普外说探查从肝开始嘛。剪到肝上膈下间隙，可以从内剪开右侧膈肌，造成右侧气胸，再中间胸骨剪开，剪开左侧，暴露心脏

可以看到心脏明显暗色的右心耳

这个时候输液针连结大针筒，大概50ml生理盐水，面对我们的心尖，那是右心室可能，我们再翻过来一些，从心尖的后面一点，那是左心室，进去使输液针的斜面空端完全消失

这个时候先剪开右心耳，大量暗色静脉血流出，再开始推针筒灌注

有人说要慢推，我个人发现快速针筒推注也行，毕竟这一步的目的是把血管内血液清除

这一步成功的标志是观察到肝脏和肠子血色消失，变成黄色

推完后换甲醛，针筒推注30ml

这一步成功的标志是可以观察到小鼠脖子颤动，尾巴翘起，以及一会儿后肝脏和肠子质地变硬，跟标本一样

初步成功后，那就放心再换成输液器滴注，调到最快的流速

全部滴完之后，可以取脑组织了

在脖子处剪下头颅，两耳之后带着脖子

观察到带着黄色脊髓的

剪开头皮 暴露颅骨

在颅中线和眼后一黑线做垂直线，剪刀横向剪开

剪刀从枕骨大孔进入，插入沿着中线剪开，最好保持剪开的连续性，不要断开，最终一刀剪开中缝

用镊子闭合划开两侧，分离脑半球离开颅骨

镊子再从前段分离，去掉视神经和面神经

本人之前失败的原因是输液针总是离开心脏，对策干脆就让右手全程扶着固定