MH7A细胞状态差

复苏后一代比一代状态差，细胞碎片非常多，差不多到四五代的时候状态差到用PBS可以轻易吹掉，排除污染仔细反思后觉得是每次消化太过（之前是胰酶1ml消化10-20秒，第四代开始消化五秒就会大片脱落）。

处理：培养液血清增加到18%，一共三瓶，一瓶每天换液（细胞碎片太多了，不及时换液的话培养液会混浊，甚至影响贴壁细胞的状态，换的太勤又会对贴壁细胞造成伤害，因此一天一换）。

状态：

两瓶分别于19号早、晚一传一（弃原培养液，无血清DMEM洗两遍，轻柔吹打，然后收集，PBS洗一遍，轻柔吹打，收集细胞，300微升胰酶消化5-10秒，1ml培养液中和，轻柔吹打，然后700r/3min离心，弃上清，加1ml培养液吹打均匀，再加3ml培养液放于培养瓶中）没有拍照，后续再来补。

看了很多前辈的经验自己尝试着救一救，同时准备再复苏一瓶，不知道处理的有没有问题，欢迎前辈们提出意见。