STZ造模II型糖尿病经验

1.本人采用的SD大鼠，鼠到了之后适应性喂养一周正常饲料，开始进行高脂高糖喂养两个月。

2.两个月后，称体重用STZ造模，大鼠造模时体重在380-580g之间，其中400-500g之间居多，偶有几只不在此区间。造模前禁食13h。造模剂量为 35mg/ml，STZ购买自sigma，缓冲溶液为冰的柠檬酸缓冲溶液，冰冷状态下PH4.2，用前先在黑暗环境中称量10只大鼠用量分装在50ml离心管中，管外事先用锡纸包上，称好后于冰盒中带到鼠房，从冰箱中取出配好的缓冲溶液，用注射器吸好缓冲溶液用量（大致准确即可，因为注射器肯定没那么准确），过无菌滤膜到50ml离心管中。缓冲液接触STZ瞬间开始计时冰迅速振摇务必使STZ充分溶解，尽量15min/10min内打完，越快越好。

3.打完的大鼠给予5%葡萄糖水和正常水，2h后喂高脂高糖饲料。72h内都是如此。

4.测血糖采用上午九点禁食下午三点测血糖，以往都是一晚上都给足够食物第二天早晨撤走，最近发下，晚上临走前撤走食物，早晨八点钟喂食物，九点钟大鼠几乎没有在继续吃的一般都已经睡了，这时撤走食物到下午三点，可以达到较准确的禁食6h血糖，测的结果较理想。

5.自己打了两批预实验20只，第一次死亡率为0成模率为50%，对剩下的鼠一周后又补打了一次STZ全部成模无死亡。但正式实验150只大鼠的时候找了别人帮忙打或者两个人抓着，大鼠死亡率达到了20%，死前发现精神状态不好，除几只血糖较高23-24左右，剩下的血糖均在15前后，伴有弥漫性凝血，眼鼻部有出血现象，身上的毛也发红，补胰岛素和打抗生素都没有救活任何一只。推测为感染死亡，随后补打的预实验10只鼠在打完STZ第二天都给了些抗生素抗感染，目前50h无一死亡，状态都还好。打完四天整几乎就不会再出现死亡现象了。

6.关于确认成模时间，建议十天左右再测血糖，我有很多鼠一周的时候测血糖都在13-16之间，不够16.7，然而十天的时候测只有两只没有够16.7，剩下的全部超过了，有的笼多尿现象很严重，还有的不太严重，但血糖是达标了的。我预实验的5只鼠成模一周后尿量激增，两周后可以一晚上喝三瓶水（1500ml），所以多尿现象的出现可能需要一些时间，不过我也有一些鼠一周内就出现了明显的多尿现象，可能是个体差异之类的吧，所以这个实验感觉不能太着急，要有耐心去等。感觉比较靠谱的是可以闻闻垫料的味道，大致就可以确认这笼有没有成模的大鼠，五只中有一只成模垫料也会有烂苹果/呕吐物的味道，哪怕垫料并没有很湿。

7.关于造模！本人有话要说！经历这么多次造模，终于大概知道降低死亡率的方法了！造模环境一定要安静，最多两个人，不要请好几个人帮忙，声音，嘈杂，环境，会对造模死亡率造成致命影响！第一次10只一个人造模，死亡率0；第二次150只三个人，中间一直在交谈，死亡率近20%；第三次十只，一人，死一只；第四次二人34只，死一只。没有科学依据，不一定适用，仅个人经历。

以上是最近的一些经验之谈，可能有的地方做的不对，也欢迎明白人批评指正，希望我的一些小小经验可以帮助到同样遇到问题的人们吧，我也是看着大家的经验一步步摸索的，希望大家有问题可以互相友善沟通，共同解决问题，让咱们都可以更加顺利的进行！