【求助】mRNA有差异,WB没有差异是为啥?
求助各位老师,目前小弟在做一个基因,编码的是一个磷酸激酶,已经构建了siRNA、过表达质粒和稳转细胞系,用QPCR检测mRNA水平均有显著差异,但做Western验证时最明显的条带位置比抗体说明书中描述的高,且过表达和敲低在WB中均不显著。已尝试了多家公司的抗体,结果都差不多,请问这种情况还应考虑哪些问题呢?实验卡在这里了,救人一命,不胜感激!!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1547
求助各位老师,目前小弟在做一个基因,编码的是一个磷酸激酶,已经构建了siRNA、过表达质粒和稳转细胞系,用QPCR检测mRNA水平均有显著差异,但做Western验证时最明显的条带位置比抗体说明书中描述的高,且过表达和敲低在WB中均不显著。已尝试了多家公司的抗体,结果都差不多,请问这种情况还应考虑哪些问题呢?实验卡在这里了,救人一命,不胜感激!!
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