dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

RGD环肽的合成(看一遍就可以自己合成的方法)

发布于 2020-09-30 · 浏览 1321 · IP 安徽安徽
这个帖子发布于 4 年零 223 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
icon推荐


img

多肽合成-RGD环肽的合成

序列:c(Arg-Gly-Asp-d型Phe-Lys) CTC 树脂1g,取代度0.3mmol/mg

1. 合成序列:我们以Gly作为肽链的C端开始合成,合成顺序为Gly、Arg、Lys、(D)Phe、Asp,用固相合成法,完成序列的合成。得到 H2N-Asp-(D)Phe-Lys-Arg-Gly-CTC Resin。

2. 肽链裂解:因为后面需要液相环合,此次我们要全保护裂解(侧链保护基保留),我们加入20%三氟乙醇+80%二氯甲烷混合液恒温裂解2h。得到H2N-Asp-(D)Phe-Lys-Arg-Gly-OH。注:通过点板或切割小试来判断反应终点。

3. 用砂芯漏斗过滤,去除树脂,将溶液倒入旋蒸瓶中,用25℃恒温旋蒸,将二氯甲烷和一些溶剂去除,然后加纯净水摇匀冻干(粉末状)12h。

4. 将冻干的多肽加入400ml二氯甲烷溶解,加入1mmol的用dmf溶解的HOBT,然后慢慢滴加0.5ml DIC,室温环合反应12h,冬天最好在恒温摇床中反应。注:控制多肽浓度,防止分子间反应。

5. 环合结束后,将DCM旋蒸掉,加入30ml 切割液(95%三氟乙酸+5%水),室温裂解2-2.5h,去除侧链保护基团。

6. 将30ml的裂解液均分到4个50ml离心管中,迅速假如6倍量的-4℃的冰乙醚,摇匀析出多肽,离心2min后倒出乙醚,乳白色沉淀就是我们需要的单环肽,再假如冰乙醚离心2次,可洗掉大多数杂质。

第五步和第六步,可参照多肽切割一文,已有很详细介绍。

版权所有,未经允许,请勿复制商用宣传。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1321

回复4 点赞

全部讨论0

默认最新
avatar
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部