人视网膜内皮细胞(HRCEC)成管实验
请问有人做过这个细胞系的成管实验吗?做了三次了,都失败了,很伤,请求高手指导。
我们的胶是康宁的高浓度的胶,第一次做,胶分管没处理好,每天都做,为了避免反复冻融,一直放在四度几天了。
细胞是刚复苏的12代HRCEC细胞,传过一次代后开始使用,这个细胞是使用高糖培养基养过好几代了,感觉细胞圆润,状态还不错。
都是冰上操作,10%的高糖完全培养基,没有加VEGF,没有稀释胶,用96孔板做的,每孔加的胶的体积是五十微,铺板密度设置了三组,一万个每孔,一万五千个每孔,两万个每孔,每孔100微升。
种细胞前,胶放入37度培养箱大概一个半小时。
4小时观察的时候,细胞有部分若干细胞练成短线状,分散不成管,与前两次情况类似,估计又失败了。
有没有高手能指点一下
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1706