酵母双杂交

最近在做酵母双杂交，然后mate涂sd/-trp/-leu/xgal/aba(0.5)然后涂了50个大板子不长单克隆咋回事，自我感觉是菌太多了长不起来，我把mate的菌稀释10000倍分别涂sd/-trp sd/-leu sd/-trp/-leu 板子计算mate效率，发现长的特别多。。想问下接下来要怎么改进？？？

我的步骤都是按照说明书做的，诱饵质粒的sd/-trp我od值摇到0.8的，然后mate的摇了22h都没问题不知道为啥菌量那么大。