序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用

序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用，如何储存？

  1）如何溶解重组胰蛋白酶冻干粉？

  使用50mM HAc 溶解或稀释。

  2）使用时，溶解液和最适pH缓冲溶液？

  使用时，按照使用终浓度直接稀释在50mM NH₄HCO₃ 或者ph7-8的酶切缓冲溶液中（含有目的酶切蛋白）。

  3）酶切缓冲液中酶和底物的比例是多少？

  在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl₂，

  重组胰蛋白酶：目的蛋白=1:20-1:100。

  4）酶切时的缓冲液最适pH？

  最适pH为7.0-8.0的缓冲液，通常用50mM NH₄HCO₃或者Tris-HCl。

  5）溶解后溶液如何保存？如果反复冻融，稳定性如何？

  溶液储存于-70℃。

  可反复冻融5次，无降解，无活性损失。