重组肠激酶在2-8℃条件下14天的稳定性

组肠激酶在2-8℃条件下14天的稳定性

试剂:

试剂A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (称取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 纯化水中， 25°C，用2mol/LHCl 调pH 8.0，加纯化水至100ml.) 

试剂 B. 重组肠激酶酶液 

2-8°C保温箱保存的三个批次的重组肠激酶(10U/µl),

试剂 C. 底物溶液

底物蛋白溶液: 50μg/支, 1mg/ml, 储存在 -80°C.

活性测定：

用试剂A稀释REK 溶液至0.1 unit /μl，取1 µl 至底物溶液中50µl (50μg/支, 1mg/ml).混匀，25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切结果。

单位定义：1U定义为在25℃，12h~16h之内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。

操作步骤：

稳定性研究：将重组肠激酶溶液储存在密封避光2 - 8℃冰箱中，分别在第1,3,5,7和14天时测定酶活性； 取三批次的平均值作为检测结果。

结果：重组肠激酶溶液在密封避光2 - 8℃冰箱中保存14天后，稳定无活性损失。