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DBA小鼠CIA造模求助

骨外科学医学生 · 发布于 2020-03-31 · IP 德国德国
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这个帖子发布于 5 年零 237 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

小弟最近在做DBA小鼠CIA造模,都失败了,愁人。现将造模过程贴出来,欢迎有经验的园友指点。

实验动物:DBA strain

实验材料:Chick type II collagen, 5ml*2mg/ml (Chondrex)

Bovine type II collagen, 5ml*2mg/ml (Chondrex)

CFA, 5ml*1mg/ml (Chondrex)

IFA, 5ml (Chondrex)

乳化剂制备:Day0 等体积collagen和CFA, 冰浴匀浆器乳化3轮,每轮2分钟,间隔5分钟,

水面测试证实匀浆均一稳定。

Day21 等体积collagen和IFA, 冰浴匀浆器乳化3轮,每轮2分钟,间隔5分钟,

水面测试证实匀浆均一稳定。

实验过程:DBA小鼠8-12周入组,年龄,性别配对。

Day0 尾根部皮内注射100ul Collagen+CFA乳化剂(Tuberculosis最终浓度为

0.5mg/ml)。

Day21 尾根部皮内注射100ulCollagen+IFA乳化剂(Tuberculosis最终浓度为

0.5mg/ml)。

我的实验:第一轮用的鸡胶原,没能诱导出来。

老板建议第二轮换乘牛胶原,所以第二轮换成了牛胶原,今天是Day30,这批老鼠

目前为止没有一点关节炎迹象,眼看要失败。

猜想:可能是CFA中Tuberculosis浓度过低?我看文献里提到CFA浓度的(有些没有提及)大

部分用的是4mg/ml,园子里有前辈之前造模成功的没看到他们体积CFA浓度。因此开

帖求助,欢迎各位前辈指点!

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