高通量靶标代谢组学研究进展

高通量靶标（定量）代谢组简介

        前面我们介绍了靶标代谢组学，它是对单个目的物的含量进行检测，这种效率非常低，在实际日常检测中满足不了我们的要求，而质谱仪的动态范围非常广，能同时对几个物质精准定量，这就是高通量靶标代谢组的起源。

       高通量靶标（定量）代谢组是，经方法优化后用同一个方法参数，同一个标曲，把样品中性质相近的一组物质一次全部定量出来。优点就是高通量、省样品——参考非靶代谢组学技术，一次能定量检测一组物质。

      通常我们会把这些物质按作用性质或来源进行分类，如氨基酸高通量靶标代谢组学、短链脂肪酸高通量靶标代谢组学、氧化三甲胺及相关代谢物高通量靶标代谢组学、胆汁酸高通量靶标代谢组学、动物激素高通量靶标代谢组学、神经递质高通量靶代谢组学、植物激素高通量靶标代谢组学、多胺及其合成通路物质高通量靶标定。今天讲的主角就是其中的一种——

短链脂肪酸高通量靶标代谢组学

     短链脂肪酸（SCFAs），随着“肠菌热”着实火了一把，是碳原子数小于6个的一类有机脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸。它们是在肠道内由微生物发酵产生，被后肠吸收后，既储存了能量又降低了渗透压。研究发现，SCFAs可以改善身体组成、葡萄糖稳态、血脂谱、降低体重和结肠癌风险。

      因为碳原子数少，易于挥发，短链脂肪酸也称为挥发性脂肪酸（Volatile fatty acids，VFA），其检测平台是GC-MS。（下一讲会把GC-MS的流程做一下梳理，这里略过）。

       短链脂肪酸高通量靶标的检测流程是：样品收集—代谢物提取—标品配置—代谢物检测—生信分析。

      实验流程跟常规的差不多，不细说。不同点在于标品配置：7种标品混合后，建一个标品体系，这里每个标品的合适浓度（实际中真实含量）需要进一步优化，注意每一种物质的LLOD和LLQD。

       这里同样要注意质控体系，不同公司做法不一样，有的公司除了传统的标品外，还引入了内标。

     关于内标的作用，这里卖个关子，大家根据上图，自己想一想。

     现在有的实验室或公司，更土豪地用上同位素内标。。。。这做法更是甩同行一大截的节奏。

    上面提到高通量靶标的分类方法，像短链脂肪酸在性质上相近，功能上也相近，方法开发起来比较容易，但有的分类，如维生素高通量靶标代谢组学开发起来难度却加大不少，维生素在功能上相近，但性质上却相差很大，有脂溶性，也有水溶性，下帖将继续介绍它们方法开发的小秘密，敬请关注！