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简单PCR 阴性对照总是扩出和目标一样条带

发布于 2019-10-11 · 浏览 3359 · IP 湖南湖南
这个帖子发布于 5 年零 212 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近在做最简单的PCR 也是我研一第一个实验,结果做了很久 阴性对照总是能扩出和目标DNA差不多大小的条带。污染的问题都考虑过了,也都换过灭菌水 Mix等等 引物也重新稀释,包括国庆隔了七天做实验 但还是有条带。。。

目前DNA大概55bp,引物长度分别是20和23。 目前改过的条件有:提高退火温度 从55到65,降低退火时间,改变cycle数,问题还是没有得到解决。 

想请教各位前辈有没有什么别的方法,现在是否还需要提高温度 或者改变cycle数?十分感谢


图左边是目的DNA 右边是阴性对照。

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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3359

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