求助如何利用鲁米诺测定植物叶片活性氧含量变化！！！
发布于 2019-09-07 · 浏览 3545 · IP 湖北湖北
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看别人文献报道可以利用鲁米诺+辣根过氧化物酶体系测定植物叶片中ROS的含量。请教几个问题，非常期待大家可以帮忙，非常感谢。
1.鲁米诺用0.1M NaOH配制成0.01M的溶液，配好的溶液要放置多久，温度有要求吗？而工作浓度是100 uM，请问稀释到工作浓度使用蒸馏水还是不同pH的缓冲液呢？或者在哪个pH条件下，反应会灵敏点？
2.稀释鲁米诺的缓冲液pH应该会影响辣根过氧化物酶的活性吧，是不是缓冲液pH根据过氧化物酶的活性来选择？
3.对这个反应体系的原理不是太明白，按照这个体系应该是过氧化物酶催化过氧化氢生成氧来催化鲁米诺发光，还是HRP催化过氧化氢跟鲁米诺反应来增强发光？
4.我的实验是用刺激物刺激产生活性氧，是不是我在处理液中都含有鲁米诺，HRP，刺激物这三种就可以直接测定了，或者还是要按照顺序加？
实验室之前有其他人测过，没有检测到ROS的变化，对检测原理及实验方法步骤都不了解，所以非常期待大家可以帮忙，非常感谢！！！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3545
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