（實驗求助）LY294002沒有抑制pAKT
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最近將細胞處理LY294002這支PI3K inhibitor 想要探討PI3K-AKT pathway，但跑了好多次發現pAKT都沒有被抑制（反而還隨濃度升高而上升）
LY294002 stock: 40mM (powder in DMSO)
Final concentration: 20uM , 40uM
Treatment time: 6h
將細胞seeding後隔天約八成滿，處理上述濃度六小時後以冰PBS收細胞，跑Western blot看pAKT及其下游蛋白表現量，但pAKT都沒有被抑制下來
有想過是不是時間點的問題，所以有收0.5,1,2,3,6,12h時間點，但pAKT只有在0.5h有些微抑制，其餘皆比control (最高濃度的DMSO only)來得高...
真的trouble shooting 很多次但依然沒解決，請求各位師兄師姐
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 517
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