高密度发酵问题
发布于 2019-04-29 · 浏览 5808 · IP 山东山东
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小弟最近在做高密度发酵，因为之前实验室都没做过，所以在摸索阶段。目前遇到的问题是菌体浓度上不去，OD600最大只能到30~40左右。
5L发酵罐，培养基主要成分：20g/L酵母浸粉，5g/L葡萄糖，10g/L NaCl, 15g/L磷酸氢二钾，5g/L磷酸二氢钾
通压缩空气
菌种：BL21(DE3)，做重组蛋白表达（无毒）
补料：葡萄糖，pH反馈补料
37℃培养6h左右初糖耗尽，这时候转速达到1000rpm，通气量3vvm，溶氧只有20%左右，OD600只有15左右，后面接着补料，OD600达到25左右就长不上去了，溶氧也只有2%，此时降温到28度诱导，最终也只涨到35左右。
请教各位大神如何改进实现高密度啊？看别人都可以做到OD600在100以上的。。。
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 5808
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