胶体金

请教一下各位大神，我在做胶体金，遇到一些很奇怪的问题：

      1、使用间接法标记人IgG二抗，在标记过程中调好标记的Ph，加入蛋白后胶体金颜色变浅，过5min后加入封闭蛋白，再过10min后颜色变得更浅了，低速离心后直接全部贴壁，同样的条件标记其他的抗体完全没有问题,调过标记的PH值和蛋白的标记浓度，但是都没有效果，请问这是什么原因造成的？

       2、检测时个别的样本老是有非特异，试过很多方法都没有解决（加阻断剂，调节标记PH，提高稀释液的PH，增加表面活性剂的浓度，进行封闭样本垫和结合垫），请问是什么原因造成的呢？

        拜托各位大神指点一下，十分感谢！