关于用96孔板做鲍曼生物膜很容易掉的问题!!
目前我在用96孔板做鲍曼的生物膜,用的标准菌株,菌株应该不存在问题。在经过24h培养后用加样器吸PBS清洗三次,加入4%甲醛固定30min,0.1%结晶紫染色10min,再用PBS清洗至不退,加入乙醇溶解。
染色后清洗这一步我花了很多时间,因为生物膜很容易被吸走,所以每次都用加样器只吸走一半液体,再加PBS,洗至不褪色太花时间了,而且洗出来的生物膜基本掉了至少1/3,不过吸光度还是挺高的,0.7、0.8左右,但是孔间差异太大,因为有些被吸走了。
我看有人文献用自来水冲洗,比较节约时间,我也试过,基本下面的膜都没有了,孔壁上还有,测出来吸光度也有0.3,比我的阴性对照0.08也还是高。
所以现在很纠结。。。
才能把这个膜固定好,或者不被吸走,啊!!
有没有做过的亲能回答一下,谢谢各位了
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2890