【提供】外周血淋巴细胞培养基和羊水培养基
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培养基系列新产品：羊水培养基介绍
羊水培养基产品规格：产品一、5毫升/支 20支/盒 800元/盒产品二、10毫升/支 20支/盒 1600元/盒关于羊水细胞培养基 产前诊断方法中，但孕中期羊水细胞检查仍是最主要方法之一。羊水细胞（amniotic cell）是羊水内的胎儿脱落细胞的总称，可分为上皮样细胞、成纤维样细胞和形态介于两者之间的羊水样细胞，是对胎儿进行产前诊断的重要材料。由于羊水中所含细胞的脱落时间不同，大部分已经衰老或者死亡，活细胞较少，处于有丝分裂中期的细胞更少，一次抽取羊水获得的活细胞数往往达不到产前诊断的要求。因此，必须通过体外培养增加羊水细胞的数量来获得大量中期分裂细胞。 一生骏牌羊水细胞培养基专门针对羊水细胞体外培养的营养条件进行优化组合而成，添加了十余种额外的营养成分，包括激素、细胞因子、无机盐等，能在较短时间内刺激羊水细胞大量增殖，特别是对成纤维样羊水细胞具有显著的快速增殖效果。本培养基的另一特点是胎牛血清含量低于10％，可确保极低的支原体污染概率，同时低血清配方可充分保障羊水细胞在增殖过程不发生染色体变异，充分保证检测结果的准确可靠。本试剂的第三个特点是预混制，使用时直接与羊水细胞混合培养即可，无需额外再添加任何试剂，最大限度降低原代培养的污染风险。羊水培养基基本操作指南 本指南所述方法属示例性质，是本公司推荐的培养方法，但并非唯一可行的操作方案。基于一生骏牌羊水培养基具有普遍适用的特性，羊水细胞培养的具体程序可依据实验室客观条件和操作经验进行调整。本公司愿意提供技术上的指导和交流。1．主要实验材料（1） 羊水细胞：从妊娠15～20周孕妇羊水中获得（2） 培养基：两支一生骏牌羊水培养基（3） 40цg/ml秋水仙碱（4） 低渗液：0.075mol/L的KCl（5） 固定液：甲醇：冰醋酸（3：1）（6） Giemsa母液：称取0.5g Giemsa粉在研钵内，量取33ml甘油，取少量加入研钵中与Giemsa粉一起研磨至无颗粒为止，再将剩余的甘油倒入，搅拌后于50℃水浴保温2小时后，再加入33ml甲醇，搅拌均匀后储存于综色瓶中备用。（7） 0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液2．操作步骤 （1）采样：选择妊娠15～20周妇女，在无菌条件下经腹壁行羊膜穿刺术抽取羊水。弃去最初抽出的2ml，更换针筒后再继续抽取15～40ml，留2ml用于活细胞和血细胞计数，其余立即注入无菌离心管中； （2）收集：离心分离细胞，1000rpm/10min，去上清，留0.5ml上清液和细胞团，轻打混匀，用Hanks液调整细胞浓度为≥5×105个/ml； （3）将混匀的羊水细胞1ml种置于20ml细胞培养瓶内，加入一瓶一生骏牌羊水培养基，于培养瓶内轻轻吹打均匀。 （4）培养：置37℃、5％～10％CO2、饱和湿度的培养箱中培养，静置培养。5天后可见瓶底有大量羊水细胞贴壁。用滴管轻轻吸出旧培养基，更换入一瓶新的一生骏牌羊水培养基注，继续培养3～5天，即可获得大量分裂状态成纤维样羊水细胞。 （5）终止培养：在收获前4小时，加秋水仙素使终浓度为0.5～1μg/ml。此操作需实验人员判断羊水细胞处于旺盛分裂状态，可能处于； （6）细胞收集：弃培养基，用PBS洗涤，加0.025%的胰蛋白酶0.5～1ml/瓶，消化5～10min。用吸管移细胞悬液于离心管中。1000-2000rpm/10min，弃上清，留细胞沉淀； （7）预固定：加入5ml0.075mol/L KCl低渗液，轻轻吸匀，置37℃水浴20分钟。再加入2 ml固定液，混匀，预固定10分钟。离心1000rpm/7min。 （8）固定：弃上清液。加5 ml固定液，轻轻吸匀后静置30分钟，离心1000rpm/7min。弃上清液，加5 ml固定液，轻轻吸匀，静置固定20分钟（过夜也可以）。 （9）制备悬液：弃上清液，离心1000rpm/7min，用滴管小心吸弃上清液，视细胞的多少余留少许上清液。 （10）滴片：用吸管将细胞混匀，吸取细胞悬液自10-20cm高滴在一干净经冰上预冷的玻片上，轻吹散，在酒精灯下烘干或室温下自然晾干。 （11）染色：将Giemsa染液用0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液以1：10稀释，过滤；在玻片上滴加数滴染色液、染色5-10分钟，用0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液漂洗、除去多余的染液，晾干。油镜下观察，一般以细胞形态好，分裂细胞核形大，染色体分散而且带形清晰为好。 （12）正常人体细胞染色体标本的观察和计数取经上述制备好的正常人体细胞染色体标本，先在低倍镜下观察到细胞分裂中期染色体分裂相，寻找分散良好，着色较佳的分裂相，移到视野中央，换高倍镜观察，然后用油镜观察，分析人体染色体形态、计数数目，并区分出男女性别。
外周血淋巴细胞培养基操作指南
一、规格：20瓶/盒
二、培养基组成成份：
RPMI1640、血清、肝素、PHA、双抗、生长因子等
三、使用方法：
在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内，注意摇匀，置37。C培养68或69小时，用7#针头每瓶加1—2滴秋水仙素（50微克/毫升 ）摇匀，继续培养3小时左右，即可制片。
四、保质期限：在-20。C条件下，6个月
五、注意事项：
1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝，如需保存标本，应加肝素抗凝。
2、采集的外周血在冰箱4。C保存，保存期不能超过一周，否则会影响培养效果。
有需要的联系我啊~
羊水培养基产品规格：产品一、5毫升/支 20支/盒 800元/盒产品二、10毫升/支 20支/盒 1600元/盒关于羊水细胞培养基 产前诊断方法中，但孕中期羊水细胞检查仍是最主要方法之一。羊水细胞（amniotic cell）是羊水内的胎儿脱落细胞的总称，可分为上皮样细胞、成纤维样细胞和形态介于两者之间的羊水样细胞，是对胎儿进行产前诊断的重要材料。由于羊水中所含细胞的脱落时间不同，大部分已经衰老或者死亡，活细胞较少，处于有丝分裂中期的细胞更少，一次抽取羊水获得的活细胞数往往达不到产前诊断的要求。因此，必须通过体外培养增加羊水细胞的数量来获得大量中期分裂细胞。 一生骏牌羊水细胞培养基专门针对羊水细胞体外培养的营养条件进行优化组合而成，添加了十余种额外的营养成分，包括激素、细胞因子、无机盐等，能在较短时间内刺激羊水细胞大量增殖，特别是对成纤维样羊水细胞具有显著的快速增殖效果。本培养基的另一特点是胎牛血清含量低于10％，可确保极低的支原体污染概率，同时低血清配方可充分保障羊水细胞在增殖过程不发生染色体变异，充分保证检测结果的准确可靠。本试剂的第三个特点是预混制，使用时直接与羊水细胞混合培养即可，无需额外再添加任何试剂，最大限度降低原代培养的污染风险。羊水培养基基本操作指南 本指南所述方法属示例性质，是本公司推荐的培养方法，但并非唯一可行的操作方案。基于一生骏牌羊水培养基具有普遍适用的特性，羊水细胞培养的具体程序可依据实验室客观条件和操作经验进行调整。本公司愿意提供技术上的指导和交流。1．主要实验材料（1） 羊水细胞：从妊娠15～20周孕妇羊水中获得（2） 培养基：两支一生骏牌羊水培养基（3） 40цg/ml秋水仙碱（4） 低渗液：0.075mol/L的KCl（5） 固定液：甲醇：冰醋酸（3：1）（6） Giemsa母液：称取0.5g Giemsa粉在研钵内，量取33ml甘油，取少量加入研钵中与Giemsa粉一起研磨至无颗粒为止，再将剩余的甘油倒入，搅拌后于50℃水浴保温2小时后，再加入33ml甲醇，搅拌均匀后储存于综色瓶中备用。（7） 0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液2．操作步骤 （1）采样：选择妊娠15～20周妇女，在无菌条件下经腹壁行羊膜穿刺术抽取羊水。弃去最初抽出的2ml，更换针筒后再继续抽取15～40ml，留2ml用于活细胞和血细胞计数，其余立即注入无菌离心管中； （2）收集：离心分离细胞，1000rpm/10min，去上清，留0.5ml上清液和细胞团，轻打混匀，用Hanks液调整细胞浓度为≥5×105个/ml； （3）将混匀的羊水细胞1ml种置于20ml细胞培养瓶内，加入一瓶一生骏牌羊水培养基，于培养瓶内轻轻吹打均匀。 （4）培养：置37℃、5％～10％CO2、饱和湿度的培养箱中培养，静置培养。5天后可见瓶底有大量羊水细胞贴壁。用滴管轻轻吸出旧培养基，更换入一瓶新的一生骏牌羊水培养基注，继续培养3～5天，即可获得大量分裂状态成纤维样羊水细胞。 （5）终止培养：在收获前4小时，加秋水仙素使终浓度为0.5～1μg/ml。此操作需实验人员判断羊水细胞处于旺盛分裂状态，可能处于； （6）细胞收集：弃培养基，用PBS洗涤，加0.025%的胰蛋白酶0.5～1ml/瓶，消化5～10min。用吸管移细胞悬液于离心管中。1000-2000rpm/10min，弃上清，留细胞沉淀； （7）预固定：加入5ml0.075mol/L KCl低渗液，轻轻吸匀，置37℃水浴20分钟。再加入2 ml固定液，混匀，预固定10分钟。离心1000rpm/7min。 （8）固定：弃上清液。加5 ml固定液，轻轻吸匀后静置30分钟，离心1000rpm/7min。弃上清液，加5 ml固定液，轻轻吸匀，静置固定20分钟（过夜也可以）。 （9）制备悬液：弃上清液，离心1000rpm/7min，用滴管小心吸弃上清液，视细胞的多少余留少许上清液。 （10）滴片：用吸管将细胞混匀，吸取细胞悬液自10-20cm高滴在一干净经冰上预冷的玻片上，轻吹散，在酒精灯下烘干或室温下自然晾干。 （11）染色：将Giemsa染液用0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液以1：10稀释，过滤；在玻片上滴加数滴染色液、染色5-10分钟，用0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液漂洗、除去多余的染液，晾干。油镜下观察，一般以细胞形态好，分裂细胞核形大，染色体分散而且带形清晰为好。 （12）正常人体细胞染色体标本的观察和计数取经上述制备好的正常人体细胞染色体标本，先在低倍镜下观察到细胞分裂中期染色体分裂相，寻找分散良好，着色较佳的分裂相，移到视野中央，换高倍镜观察，然后用油镜观察，分析人体染色体形态、计数数目，并区分出男女性别。
外周血淋巴细胞培养基操作指南
一、规格：20瓶/盒
二、培养基组成成份：
RPMI1640、血清、肝素、PHA、双抗、生长因子等
三、使用方法：
在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内，注意摇匀，置37。C培养68或69小时，用7#针头每瓶加1—2滴秋水仙素（50微克/毫升 ）摇匀，继续培养3小时左右，即可制片。
四、保质期限：在-20。C条件下，6个月
五、注意事项：
1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝，如需保存标本，应加肝素抗凝。
2、采集的外周血在冰箱4。C保存，保存期不能超过一周，否则会影响培养效果。
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