检测凋亡Annexin V-FITC/PI双染和Hoechst 33342/PI双染的优缺点,哪个更合适做贴壁癌细胞
大家好,第一次发帖,最近要做凋亡,网上查了两种染色方法,一种是Annexin V-FITC/PI双染,其原理是Annexin V可以与磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)结合,识别早期凋亡细胞,PI不能透过正常细胞,在凋亡晚期或者坏死细胞中可以透过细胞膜,用来识别晚期凋亡和坏死细胞。还有一种方法是Hoechst 33342/PI双染,Hoechst 33342可以少量透过正常的细胞膜,发生凋亡时细胞膜通透性增强,DNA结构发生改变,p-糖蛋白泵功能受到损;Hoechst 33342透过细胞膜量增加,且更容易与DNA结合,荧光强度增加,可以识别凋亡细胞,PI用来识别坏死细胞。然而,这两种方法的优缺点是什么,哪一个更合适做贴壁细胞的凋亡,我是想用荧光显微镜拍照或者流式细胞仪两种方法都做。