如题,刚接触CE-SDS,有若干问题困扰求高手解答:
1、一个IgG1单抗,仅有N297糖链,进行非还原CE时,去糖链的NG-IgG 约占7%左右,但在还原CE-SDS时,NGHC仅占1%。 两者比例差异为何如此大?
2、同上分子进行还原CE-SDS时,平台条件是终巯基乙醇浓度1.4M,加热10min,有2%左右不完全还原组分存在;即使提高巯基乙醇比例,增加加热时间,更换成Tecp, 不完全还原组分比例未有变化。其他抗体并无此现象。 请教此类不完全还原组分主要是什么,如何产生,以及如何去验证是本身样品含有而非分析条件的导致。 谢谢