液相色谱柱分离磺胺抗生素,有2种物质出峰时间重合。求教如何改进梯度洗脱方法?
刚接触液相色谱,我实验室柱子是inertsil ODS-3 ,它的填料是在高纯度球状硅胶上化学修饰具通用性的十八烷基填料,实现了理想的端基封尾处理,无论是碱性化合物还是酸性化合物吸附都较小,是方法开发的首选色谱柱。(关于这柱子更详细信息百度可以查到)(我实验室柱子尺寸:4.6mm i.d.,150mm色谱柱长度,5uM色谱填料粒径)
目的是分离5种磺胺标准品,从下图看到出来4个峰,最后1个峰的峰面积是前面峰的2倍,说明有2种物质出峰时间重合了,求高手指导一下如何在现有的梯度方法上改进?
我的流动相A:水(含0.3%甲酸)
B:纯甲醇
梯度洗脱方法
0min 甲醇17%
14min 甲醇34.7%
20min 甲醇 95%