小鼠原代气管上皮细胞接种2天后黏连成片状物？
这个帖子发布于 7 年零 134 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
之前分别采用刮法和酶消化法提取，
接种时可以看见大的圆形透亮成簇的细胞，其余大部分为红细胞
【刮法】 是分离气管树——用刀片刮气管内壁5-6次——收集培养皿中的液体——离心——PBS重悬离心弃上清——无血清培养基重悬离心弃上清——接种
【酶消化】 是将分离出来气管树剪碎——7ml 0.25%胰酶/EDTA 于15ml离心管中 37°C 振荡消化1小时40分钟——DMEM/10%FBS重悬中止——过70um细胞筛网——PBS重悬离心弃上清——无血清培养基重悬离心弃上清——接种
接种到Sciencell支气管上皮专用的无血清培养基中，之前也用100ug/ml 7KD-15KD的多聚赖氨酸铺了板
【问题】接种时基本为透亮的悬液，接种后约48h观察，可以看见培养皿底有一层薄膜，可以吹打下来，但是吹打换液后，细胞就都没了。而且也没有看见呈三角形贴壁的上皮细胞啊。
想问一下，这种薄膜是因为没有用DNA酶引起的吗？之前需不需要裂解RBC啊？为什么细胞不贴壁啊？
20 19 3
