求助,外参Ct值不稳定~~~~(手动哭脸)
本人研究生一枚,刚刚确定了研究方向,我做的是血浆miRNA,之前师兄师姐们都没有做过,我就自己看文献、逛园子,学习了很多,先要谢谢丁香园各位前辈的帮助,总算在上周做出来图了~~小小兴奋了一把
我的参照物用的是外参,在提取的时候就加入到血浆中,用的天根的试剂盒,使用的是柱法提取,前天做了一板96孔,一共8个样本。然后我就发现外参的Ct值变化好大,最小20,最大26(26.16713 25.4036 22.75283 24.41117 20.11353 22.09907 21.47463 20.67847)。理论上我加的外参是一样的,一批做的,同样的操作,不应该差这么多啊,今天我又做了4个样本,又是想哭的心情,最小的18,最大的25。
高手指导一下~~~急需帮助啊~~~
2017-05-17更新
昨天和天根的技术联系后,建议我将PCR程序中的预扩增删掉,我今天再做了一遍,做了4个样本,最小21,最大28……哎……
最后编辑于 2017-05-17 · 浏览 6346