脂肪干细胞成骨分化定量分析相关问题

最近在做脂肪干细胞的分化功能。并且比较分化能力大小。
成骨分化大概五天就能看到明显变化，但是染色还是要十天后，大概12天左右效果最好。诱导容易染色容易，但是问题是怎么进行染色这方面的定量分析啊。要求不做western不做pcr.
目前我用的方法是茜素红染色后，加10%氯化十六烷基吡啶去色，酶标仪562分析。
但是结果做出来特别奇怪。我想问问前辈们，用十六烷基吡啶后进行酶标仪测定的原理是什么？如果要测钙的od值，染色前进行一次酶标仪测量不就可以？
急需，今晚受到太大打击，一个月的努力，两个通宵，白费了……不胜感激