毕赤酵母诱导表达
前期我用Pme I酶线性化pPICZaA载体后进行电转SMD1168酵母菌株,挑单菌落,经特异性引物与通用引物验证后均为阳性克隆子。在YPD活化后转接到50ml BMGY中进行扩大培养,当OD600达3.0时进行菌体沉淀,移入100ml BMMY中诱导表达。但是诱导好几次都没有表达出蛋白。后面重新换了线性化位点(Sac I),再一次构建酵母表达菌株,验证后进行诱导表达,还是表达不出蛋白。请教各位做酵母表达的前辈,帮忙分析下有可能是什么原因造成的呢?能不能解决这个问题?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1876