原代大鼠心肌细胞miRNA内参问题

本人在做原代大鼠心肌miRNA差异性表达，内参一直有问题，最先是用U6做内参，

结果不稳定，变化较大，CT值很高，基本在30以上，偶尔会在二十几。传几个结果说明一下。

实验材料：乳鼠心肌细胞（取出生1-3d的SD大鼠），RT-PCR试剂盒及引物是广州复能基因公司的

还有好多这样的结果，先传这两个。联系技术说可能是U6不适合做原代大鼠心肌细胞的内参，故换了一个miR-16试用。结果如下

想请大家帮我分析下，像这种内参CT值在28左右的结果可能用？miR-16在原代大鼠心肌细胞是高表达的还是低表达的？miR-16作为内参有没有高分可信度好的文章为依据？目前我只看到两篇低分的文章，如有的话，麻烦大家提供一下，谢谢！实验急用，谢谢。

我还有疑惑，是不是压根不是内参问题，而是我的试剂盒出了问题，所以导致我的内参CT值偏大？但我的目的miRNA的CT值还是好的，前面的师兄师姐做的细胞系和成年大鼠原代的miRNA也是差不多在33左右的，所以感觉应该不是这个问题。

 各位大神帮小弟看看吧！