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NADH-TR染色求助!!!

发布于 2016-04-16 · 浏览 3934 · IP 广东广东
这个帖子发布于 9 年零 38 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

各位大神你们好,我第一次做还原型辅酶Ⅰ四氮唑还原酶(NADH-tetrazolium reductase, NADH-TR)染色,用的是大鼠骨骼肌组织切片。按以下的操作步骤:

染色液配制:

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-Sigma N8129      8mg

硝基四唑氮蓝(Nitro blue tetraolium-Sigma N6876) 10mg

0.2mol Tris HCl缓冲液pH7.4  10ml

二甲亚砜(DMSO)                1ml

以上试剂临用前新鲜配制,配制方法将NADH,NBT,Tris-Hcl混合后,电炉加热并搅拌均匀,加入DMSO然后用玻璃棒搅拌2~3分钟,过滤后使用。调PH至7.4.

染色步骤:

1.切片于孵育液中37℃孵育15-30 min。

2.流水冲洗1min。

3.蒸馏水洗3次。

4.甘油-明胶封片

做出来的图片染色背景是黄色的,不是蓝色的,是哪里出了问题呢?求各位大神帮助一下!不胜感激!

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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3934

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