【求助】牙龈成纤维细胞取材

小女子目前原代培养人牙龈成纤维细胞。之前总是污染，现在不污染，但我用组织块法10多天了仍无细胞游出。我想肯定是我做错了，养了快2个月了，什么结果都没有，都说牙龈成纤维细胞好养，我却举步维艰，各种压力山大，各位大牛同仁帮我解答一下吧。第一步都这么难，简直不敢想以后呀( ⊙ o ⊙ )！
1.从口外门诊取材，取材病人年龄稍大，约30岁。不知有无影响？有同学养牙槽骨干细胞，40岁的也疯长。
2.取自健康人阻生牙翻瓣术牙龈组织，置入1万单位双抗母液，立刻运回实验室，间隔半小时。因为怕污染，所以选用直接买好的1万单位双抗母液，未加PBS。不知我这样操作会不会使细胞失去活性？有文献说取材后应放入含2倍或3倍含双抗的无血清DMEM中，不知这样会不会污染？我取的新鲜组织块应放在什么里面最佳呢？SOS！！
3.取回后在超净台内分别用甲硝唑、庆大、PBS反复冲洗。历时1小时。请问各大牛，组织块这么长时间不接触培养基有无影响？
4.今天有同学提醒可以尝试加谷氨酰胺，之前从未加过，不知加一些谷氨酰胺会不会令细胞起死回生？是不是培养基2周后都需要加谷氨酰胺？