【求助】厌氧菌以及噬菌体

实验过程中遇到了问题，想请教有相关经验的朋友们，感激不尽！
1. 我研究的是艰难梭菌噬菌体，现在才刚开始做。一个月前，我筛选到了两株噬菌体，但是噬菌斑很浅，所以就没有拍照，想着以后做好一点再拍。没想到，之后就再也没有出现过了。现在都不知道是为什么？？？所以想请教做噬菌体的同行朋友们帮我分析分析，谢谢！
2. 不仅如此，此后做实验，各种不顺利，先是菌株污染（用菌液铺板，平板上长的菌落几乎全是迟缓埃格特菌（16SRNA鉴定）），然后如下图：600ul，OD值0.892的菌液与BHI混合后浇上层平板，居然没有长满！！！后来，我想是不是菌量不足或者培养基太烫，然后专门拿各种体积的菌液（50/100/400/800ul，OD1.021）铺板，然后琼脂冷却到了50℃以下，结果还是这样，压根就长不满也没有浓度差异。现在如果这个问题没有解决感觉我就做不下去了，求各位帮忙分析分析，并给我指一条明路？？？？（PS：我自认为操作没有问题，因为做需氧菌的时候一切正常）谢谢！

3. 请问筛选噬菌体的时候，菌液一定要是对数期的吗还是数量够就行？为什么？4. 请问什么地方最有可能有厌氧菌的存在？我想去找点样品再次筛选
5. 请问用spot-test法筛选噬菌体的时候，法一：先将菌液涂布上层平板然后再加噬菌体样品；法二：菌液和上层琼脂混匀后铺板，再加噬菌体样品。哪种方法好？
6. 艰难梭菌在非厌氧条件下，大概能存活多久？因为我怀疑我每次实验时，菌液曝露于有氧条件至少30分钟以上是不是就死掉了。培养艰难梭菌的注意事项。
期待你们的回答，感激不尽！