电生理脑片（海马）制作方法

近日，要做大鼠的海马的实验，查阅了丁香园的许多资料，经过本人整理和考证，作出以下的内容，希望对大家有帮助。感谢以前发贴的朋友。
制备电生理离体海马脑片的步骤如下：
1.将大鼠急性断头。老鼠断头前要使之平静，受惊吓的老鼠对电生理记录有影响。脑片状态也会不好。
2.打开头颅骨，常规切取出脑组织。整个取脑过程要限制在短时间内，熟练的话1分钟内完成。还要记住整个过程要在冰冷环境中完成，起冷保护作用。即操作所用器械，操作台都需预冷。
3.脑取出后要迅速转到预冷，通混合气的ACSF中。
4.下一步所需准备好后马上取出脑。用最快的方法，在冰冷操作台上切出自己所需脑组织，修整组织，用琼脂将修整后的组织粘贴到切片台上，转入切片槽（ACSF CO2/O2）。
5.用振荡式切片机对脑组织进行切片，片厚60～400um (在10分钟内完成)
6. 移至人工脑脊液中孵育使脑片恢复，一般25度左右（时间控制在10h以内）， 1h后即可使用，一般不超过12h。
7. 整个过程最好不超过30分。

ACSF的配法
第一种：
Nacl：126 mmol/L
Kcl：5 mmol/L
KH2PO4：1.3 mmol/L
MgSO4：1.3 mmol/L
Cacl2：2.4 mmol/L
NaHCO3: 26 mmol/L
Glucose:10 mmol/L
蒸馏水配制
第二种：
Nacl：119 mmol/L
Kcl：2.5 mmol/L
NaH2PO4：1 mmol/L
MgSO4：1.3 mmol/L
Cacl2.H2O：2.5 mmol/L
NaHCO3: 26.2 mmol/L
Glucose: 11 mmol/L
ddH2O配制(2L)
渗透压：290～300（非常重要，建议每次配好都测量）
4度保存