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🧫 新手必看:流式细胞实验 protocol 合集(内含福利)

已认证的机构号 · 发布于 2022-10-18 · IP 浙江浙江
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这个帖子发布于 3 年零 27 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

流式细胞术是非常让人着迷的实验——高速客观、结果稳定、具有统计学意义,能够处理复杂样本并同时获取多种参数。

今天丁香实验给大家整理了流式细胞术从「实验设计」到「结果分析」的全流程 protocol,建议转发收藏!

如果你是新手小白,最近刚好在做流式实验,千万别忘了参与👇科研提问活动 · 免疫专场, 前 150 位参与活动,还可获得 丁香实验定制笔记本 哦~

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第一步

设计你的流式细胞实验

很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患,最常见的问题就是——对照设置不合理,最后导致整体实验失败或数据不理想。

流式对照至少有 5 种。

生物学对照,空白对照,同型对照(Isotype control),补偿对照(也叫单阳性对照)和 FMO 对照,主要目的是为了避免出现的假阳性或假阴性结果。

更多流式实验相关学习内容,可以戳下方文字查看哦~

📕 流式实验如何配色?

📕 流式实验该准备多少管样本?

📕 如何设置流式实验对照?


第二步

细胞悬液样本制备

流式细胞术的分析检测建立在单个细胞的基础上,所以制备合格的单个分散的细胞悬液是非常关键的一环。

对不同来源和不同形式的样品,根据各种样品的特点可选择不同的分散方法。


01、单层培养细胞、血液、各种脱落细胞等样品

标本经过简单的制备悬液,离心分离处理,就可以得到分散较好的单个细胞悬液,是理想的流式细胞术检测对象。


02、不同组织来源的实体组织标本

采用酶消化法、机械法和化学试剂处理法来分散细胞。

👉点此查看流式细胞样本制备 protocol

👉点此查看流式细胞样本制备 protocol

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第三步

流式检测操作流程

实验目的不同,检测的数据也各不相同,以下是一些常用实验方法,建议收藏:

🧪 Annexin V 荧光双染细胞凋亡检测

🧪 流式细胞仪检测细胞周期

🧪 流式细胞仪检测细胞内因子

🧫 流式配色基本原则

🧫 流式细胞表面染色步骤

🧫 用流式细胞术计数网织血小板

很多同学第一次操作流式细胞仪器的时候非常紧张,生怕哪一步做错,弄坏了上百万的实验设备

仪器的操作确实有很多讲究,比如:

「检查鞘液桶及废液桶:鞘液桶应含有足够的鞘液,废液桶应在上次使用后清洗干净」

「使用后的清洗 所有样品测定完后,要进行仪器的清洗」

流式细胞仪器使用方法和流程已帮大家做好梳理:

👉点此查看流式细胞仪使用操作

👉点此查看流式细胞仪使用操作

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第四步

流式检测结果分析

实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。

由数据还可以做出曲线进行定量分析,不过很多新同学很难读懂图片代表的含义

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其实,不管是操作细节,还是实验图片,大部分人遇到问题,还是会先请教自己的导师、师兄师姐,但是即便如此,有时候也只能得到片面的解答,不能知悉全貌,甚至还是在流式的「坑」里来回打转……所以,对外要学会「借力」,多听听不同的建议和声音。

这一次,我们特别请到了伊莱瑞特的专家团们,来到丁香实验的问答广场上,对大家发布的免疫类问题,进行积极解答,得到解决方案的同时,还能领取科研周边礼品哦👇

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丁香实验 & 伊莱瑞特

流式实验问答活动

 开始啦


发布提问后点此

👉填写收货地址👈

(请先发布提问,再填写收货信息)


活动时间:10 月 10 日 ~ 11 月 6 日

Step 1:

👉 戳 >>> 这里 <<< ,进入丁香实验问答广场,点击蓝色按钮【我要提问】输入问题,选择对应的免疫的实验,点击提交。

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(点击大图查看提问指导)


Step 2:

等待自己的提问发布后,戳 >>> 表单 <<< 填写地址👇,坐等奖品到家,就这么简单!

发布提问后点此

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此次活动,将按照成功发布提问数发放对应奖励:

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 (礼品数量有限,先到先得)

 

欢迎大家将自己的提问,分享至自己的实验室群、学习群等科研人聚集地,帮助有相同实验问题的同学,一同查看解决方案哦~

举办活动的初衷是为了帮助大家解决科研实验问题,如果系统识别到恶意刷榜挤占榜单,非科研实验问题一律不予发货哦,请大家公平参与!

有专家大牛坐镇,还能领取惊喜好礼,从现在起到 11 月 6 日都可以参与活动哦,快快来参加吧👇


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*说明:

1、活动最终解释权,归丁香实验所有

2、所有活动数据公平公正公开,任何违规操作刷榜行为,一经发现,将取消活动参与资格,并封禁账号,请诚信参与活动

3、活动奖励,将在 11 月 6 日活动结束后 14 天内,统一安排寄送,请耐心等待

4、此次活动仅前 150 位发布提问可获得实验笔记本 1 本,成功发布 2 个提问,可获得小鼠 U 盘 1 个

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