【求助】iptg诱导前后蛋白表达不明显
发布于 2014-10-06 · 浏览 3175 · IP 广东广东
这个帖子发布于 10 年零 212 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人在做一个大约70kd蛋白的诱导表达 试过37℃、16℃诱导，OD600一般保证维持在0.5左右，iptg的浓度也试过0.1,0.3,0.5mM，用过试管摇菌也用过大的锥形，但都发现诱导前后蛋白表达差异并不明显。诱导过很多次了都没有的改善 ，只看到低温时上清中比较多，请各位大神指教！质粒载体用的是pet28a，克隆用了D5α（当时就有摇菌很不顺利，几乎20h小时才明显浑浊），表达用的是BL21（DE3）。不知道是感受态细胞有问题吗，还是哪里需要优化改进？我需要从头重新做吗？
，
，
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3175
5 2 点赞
